Ապրանքներ

Սպիտակուցի ֆոսֆորիլացումը կարգավորում է տարբեր բջջային գործառույթները և առանցքային դեր է խաղում բույսերի վաղ զարգացման գործում:Արաբիդոփսիսի սածիլներում սպիտակուցի ֆոսֆորիլացման նախորդ հետազոտությունները լրացնելու և ընդլայնելու համար մենք օգտագործեցինք այլընտրանքային մոտեցում, որը միավորում է սպիտակուցի արդյունահանումը չդենատուրացնող պայմաններում անշարժացված մետաղ-իոնային մերձավորության քրոմատագրման հետ (IMAC) անձեռնմխելի ֆոսֆորիլացման հարստացում Rubisco-ով սպառված քաղվածքներում, որին հաջորդում է նույնականացումը: օգտագործելով երկչափ գելային էլեկտրոֆորեզ (2-DE) և հեղուկ քրոմատոգրաֆիա-տանդեմ զանգվածային սպեկտրոմետրիա (LC-MS/MS):Գելային տրիփսինի մարսումը և ընտրված գելային բծերի վերլուծությունը հայտնաբերել են 144 ֆոսֆորիլացված պեպտիդներ և մնացորդներ, որոնցից միայն 18 ֆոսֆոպեպտիդները և 8 ֆոսֆոսիտները հայտնաբերվել են PhosPhAt 4.0 և P3DB Arabidopsis thaliana ֆոսֆորիլացման վայրերի տվյալների բազայում:Հայտնաբերված 82 ֆոսֆոպրոտեինների կեսից ավելին ներգրավված է եղել ածխաջրերի նյութափոխանակության, ֆոտոսինթեզի/շնչառության կամ օքսիդատիվ սթրեսի արձագանքման մեխանիզմների sms-ներում:2-DE-ից և LC-MS/MS-ից առաջ անձեռնմխելի ֆոսֆոպրոտեինների հարստացումը, ըստ երևույթին, ուժեղացնում է ֆոսֆորիլացված թրեոնինի և թիրոզինի մնացորդների հայտնաբերումը, համեմատած այն մեթոդների հետ, որոնք օգտագործում են պեպտիդային մակարդակի հարստացում, ինչը ենթադրում է, որ երկու մոտեցումները որոշակիորեն փոխլրացնող են ֆոսֆորիլացման տեղամասի ծածկույթի առումով:Երիտասարդ սածիլների արդյունքները համեմատելով արաբիդոպսիսի հասուն տերևների համար նախկինում ստացվածների հետ՝ հայտնաբերեցին հինգ սպիտակուցներ, որոնք տարբեր կերպով ֆոսֆորիլացված են այս հյուսվածքներում՝ ցույց տալով այս տեխնիկայի ներուժը՝ բույսերի զարգացման ընթացքում սպիտակուցի ֆոսֆորիլացման դինամիկան ուսումնասիրելու համար: