Ապրանքներ

Կոլիկինի E1 ալիքի տիրույթի մեմբրանի տոպոլոգիան ուսումնասիրվել է ֆլյուորեսցենտային ռեզոնանսային էներգիայի փոխանցման (FRET) միջոցով:FRET-ը ներառում էր գենետիկորեն կոդավորված ֆլուորեսցենտային ամինաթթու (կումարին) որպես դոնոր և ընտրովի պիտակավորված ցիստեինի մնացորդ՝ կապված DABMI (4-(դիմեթիլամինո)ֆենիլազոֆենիլ-4'-մալեյիմիդ) հետ՝ որպես FRET ընդունող:Լյումինեսցենտային կումարինի մնացորդը ներառվել է սպիտակուցի մեջ ուղղանկյուն tRNA/aminoacyl-tRNA սինթետազ զույգի միջոցով, որը թույլ է տվել ընտրովի ընդգրկվել կոլիկինի ալիքի տիրույթում գտնվող ցանկացած տեղամասում:Յուրաքանչյուր տարբերակ պարունակում էր կանգառ (TAG) մուտացիա՝ կումարինի ինկորպորացիայի համար և ցիստեին (TGT) մուտացիա՝ DABMI կցման համար:1-6 խխունջների ներսում վեց միջապտուտակային հեռավորություններ որոշվել են՝ օգտագործելով FRET վերլուծությունը ինչպես լուծելի, այնպես էլ թաղանթով կապված վիճակների համար:FRET-ի տվյալները ցույց տվեցին մեծ փոփոխություններ 3-6 խխունջների միջև միջպարճային հեռավորությունների մեջ՝ թաղանթային միացումից հետո՝ նոր պատկերացում տալով կապուղու տիրույթի թաղանթով կապված կառուցվածքի մասին:Ընդհանուր առմամբ, կումարին-DABMI FRET միջպարխային արդյունավետությունը նվազել է թաղանթին միանալուց հետո՝ հիմնվելով կոլիկինի ալիքի հովանու մոդելի վրա:Ալիքի տիրույթի փակ վիճակի փորձնական մոդելը մշակվել է ընթացիկ և նախկինում հրապարակված FRET տվյալների հիման վրա:Մոդելը առաջարկում է 1-7 պարույրների շրջանաձև դասավորություն ժամացույցի սլաքի ուղղությամբ՝ 1, 6, 7 և 10 պարույրների արտաբջջային կողմից և թաղանթային միջերեսային միացումից 8 և 9 պարույրներով ձևավորված կենտրոնական տրանսմեմբրանային մազակալի շուրջ: