Ապրանքներ

Ֆլուորեսցեինի և ֆլուորեսցեինի մեթիլ էսթերի մոնոգալակտոպիրանոզիդները. սինթեզ, ֆերմենտային հիդրոլիզ բիոտնիլացված β-գալակտոզիդազով և թարգմանական դիֆուզիոն գործակիցի որոշում

Ֆլուորեսցեինի մոնոգլիկոզիդները (d-galactopyranoside (FMG) և d-glucopyranoside) և դրանց մեթիլ էսթերը (MFMG) պատրաստվել են ացետոբրոմոգլյուկոզա/գալակտոզից և ֆլուորեսցեին մեթիլ էսթերից՝ լավ ելքով:Կատարվել են գալակտոյի ածանցյալների ֆերմենտային հիդրոլիզի փորձեր (բիոտինիլացված β-գալակտոզիդազի օգտագործմամբ) և հաշվարկվել են կինետիկ պարամետրերը:Հիդրոլիզի ընթացքում նկատվել է ֆլուորեսցենցիայի ինտենսիվության 15-20 անգամ ավելացում:Ֆլյուորեսցենցիայի գծային աճ է նկատվել կարճ ժամանակում և սուբստրատի ցածր կոնցենտրացիայով, ինչը այս միացությունները դարձնում է օգտակար և զգայուն զոնդեր գալակտոսիդազների համար:Միքայելիս–Մենտենի հաստատունի (կմ) արժեքի մեծությունը MFMG-ի համար ավելի բարձր է, քան FMG-ինը, ինչը ենթադրում է ֆտորոգեն սուբստրատի հնարավոր կոնֆորմացիոն փոփոխություն:FMG-ով բիոտինիլացված β-Գալի համար կմ արժեքն ավելի ցածր է, քան բնիկ ֆերմենտի համար:Այս դիտարկումը ցույց է տալիս, որ բիոտինիլացված ֆերմենտի սուբստրատային կապն ավելի բարձր է, քան բնիկ ֆերմենտը:Թարգմանական դիֆուզիոն գործակիցները չափվել են ինչպես ֆտորոգեն սուբստրատների, այնպես էլ արտադրանքի համար՝ օգտագործելով ֆլյուորեսցենտային հարաբերակցության սպեկտրոսկոպիա:Ֆտորոգեն սուբստրատների և ֆերմենտային հիդրոլիզի արտադրանքի թարգմանական դիֆուզիոն գործակիցները չափվել են որպես նման՝ 3,5–4,5 × 10−10 մ2 s−1 միջակայքում։Այսպիսով, ֆերմենտային կինետիկայի բարելավումը կամ հետամնացությունը սուբստրատի և արտադրանքի թարգմանական շարժունակության տարբերության պատճառով այնքան էլ ակնհայտ չէ: