նորություններ

Մեր շրջապատում կան բազմաթիվ չերգված հերոսներ, որոնք կարծես թե սովորական են, բայց իրականում լուռ շատ բան են նպաստում մեզ։Proteinase K-ն մոլեկուլային ախտորոշման արդյունաբերության «չգերազանց հերոսն» է, թեև արդյունաբերության «մեծ և հզոր»-ի հետ համեմատած՝ պրոտեինազ K-ն այնքան ցածր մակարդակի վրա է, որ մենք երկար ժամանակ անտեսել ենք դրա կարևորությունը:Պսակի նոր համաճարակի բռնկման հետ մեկտեղ պրոտեինազ K-ի պահանջարկն աճել է, և առաջարկը տանը և արտերկրում շատ հետ է մնում սպառումից, և բոլորը հանկարծ հասկացան, որ պրոտեինազ K-ն այնքան կարևոր է:
Ո՞րն է պրոտեինազ K-ի օգտագործումը
Proteinase K-ը սերինային պրոթեզեր է՝ պրոտեոլիտիկ ֆերմենտային ակտիվությամբ և կարող է պահպանել ակտիվությունը միջավայրերի լայն շրջանակում (pH (4-12,5), բարձր աղի բուֆեր, բարձր ջերմաստիճան 70°C և այլն):Բացի այդ, պրոտեինազ K-ի ակտիվությունը չի արգելակվում SDS-ով, միզանյութով, EDTA-ով, գուանիդինի հիդրոքլորիդով, գուանիդին իզոթիոցիանատով և այլն, և որոշակի քանակությամբ լվացող միջոց կարող է նաև ուժեղացնել պրոտեինազ K-ի ակտիվությունը: Բժշկական բուժման մեջ (վիրուսային և մանրէաբանական ախտահանում) ), սննդամթերք (մսի փափկեցում), կաշի (մազերի փափկեցում), գինեգործություն (ալկոհոլային մաքրում), ամինաթթուների պատրաստում (քայքայված փետուրներ), նուկլեինաթթուների արդյունահանում, in situ հիբրիդացում և այլն, պրոտեինազ K Կան կիրառություններ։Ամենատարածված օգտագործումը նուկլեինաթթվի արդյունահանումն է:
Proteinase K-ն կարող է ֆերմենտացնել նմուշի բոլոր տեսակի սպիտակուցները, ներառյալ այն հիստոնները, որոնք սերտորեն կապված են նուկլեինաթթուների հետ, այնպես որ նուկլեինաթթուները կարող են ազատվել նմուշից և արձակվել էքստրակտի մեջ՝ հեշտացնելով արդյունահանման և մաքրման հաջորդ քայլը:Վիրուսային նուկլեինաթթվի հայտնաբերման ժամանակ պրոտեինազ K-ն վիրուսի նմուշառման լուծույթի կարևոր բաղադրիչներից է:Proteinase K-ն կարող է ճաքել և ապաակտիվացնել վիրուսի ծածկույթի սպիտակուցը, որն ավելի անվտանգ է տեղափոխման և հայտնաբերման փուլում.Բացի այդ, պրոտեինազ K-ն կարող է նաև քայքայել RNase-ը, որը կանխում է վիրուսային ՌՆԹ-ի քայքայումը և հեշտացնում նուկլեինաթթվի հայտնաբերումը:
Proteinase K-ի մեկ գիշերվա համբավը
Անկախ նրանից, թե գիտական ​​հետազոտությունների, թե IVD ոլորտում, նուկլեինաթթվի արդյունահանումը ամենահիմնական փորձն է, ուստի պրոտեինազ K-ն միշտ եղել է շատ կարևոր գոյություն:Այնուամենայնիվ, նախկինում պրոտեինազ K-ն շատ ավելի քիչ հայտնի էր, քան նրա դերը:Դրա մեծ մասը պայմանավորված էր նրանով, որ պրոտեինազ K-ի առաջարկի և պահանջարկի հարաբերությունները շատ կայուն էին:Քչերը կմտածեն, որ պրոտեինազ K-ի մատակարարումը խնդիր կլինի:
Պսակի նոր համաճարակի բռնկման հետ մեկտեղ աճել է նուկլեինաթթվի փորձարկման պահանջարկը:2020 թվականի հունիսի վերջի դրությամբ Չինաստանն ավարտել է մոտ 90 միլիոն նոր թագի փորձարկումներ, և այս թիվն էլ ավելի տագնապալի է համաշխարհային մասշտաբով:Նուկլեինաթթվի արդյունահանման փորձերում պրոտեինազ K-ի աշխատանքային կոնցենտրացիան կազմում է մոտ 50-200 մկգ/մլ։Ընդհանուր առմամբ, նուկլեինաթթվի նմուշ հանելու համար պահանջվում է մոտ 100 մկգ պրոտեինազ K:Իրական օգտագործման դեպքում, նուկլեինաթթվի արդյունահանման արդյունավետությունը բարձրացնելու համար, հաճախ Proteinase K-ն կօգտագործվի մեծ քանակությամբ:Նոր կորոնավիրուսի նուկլեինաթթվի հայտնաբերումը մեծ քանակությամբ պրոտեինազ K-ի պահանջարկ է բերել։Proteinase K-ի առաջարկի և պահանջարկի սկզբնական հավասարակշռությունը արագ խախտվեց, և պրոտեինազ K-ն մեկ գիշերվա ընթացքում դարձավ համաճարակի կանխարգելման կարևոր նյութ:
Կ–ի պրոտեինազի արտադրության դժվարությունները
Թեև համաճարակի զարգացմամբ մարդկանց կողմից գնահատվել է պրոտեինազ K-ի կարևոր արժեքը, ամոթալի է, որ պրոտեինազ K-ի չափազանց ցածր մակարդակի պատճառով հայրենական մի քանի ընկերություններ ներգրավված են եղել պրոտեինազ K-ի արտադրության մեջ: Երբ մարդիկ ցանկանում են ստեղծել պրոտեինազ K արտադրություն Արտադրության գործընթացում պարզվել է, որ պրոտեինազ K-ն չափազանց հատուկ սպիտակուց է:Չափազանց դժվար է կարճ ժամանակում ընդլայնել պրոտեինազ K-ի արտադրական հզորությունը:
Proteinase K-ի լայնածավալ արտադրությունը բախվում է հետևյալ դժվարություններին
1. Ցածր արտահայտություն
Proteinase K-ն կարող է ոչ հատուկ կերպով քայքայել սպիտակուցների մեծ մասը և լուրջ թունավորություն առաջացնել հյուրընկալող բջիջի համար:Հետևաբար, պրոտեինազ K-ի արտահայտման մակարդակը հիմնականում շատ ցածր է:Արտահայտման համակարգերի և շտամների սկրինինգը, որոնք բարձր արտահայտված են պրոտեինազ K-ում, սովորաբար պահանջում են ավելի երկար ցիկլ:
2. Պիգմենտների և նուկլեինաթթուների մնացորդներ
Լայնածավալ խմորումը բերում է մեծ քանակությամբ պիգմենտների և նուկլեինաթթվի մնացորդների:Դժվար է հեռացնել այդ կեղտերը պարզ մաքրման գործընթացով, իսկ բարդ մաքրումը մեծացնում է արժեքը և նվազեցնում վերականգնման արագությունը:
3. Անկայունություն
Proteinase K-ն բավականաչափ կայուն չէ, այն կարող է ինքն իրեն ֆերմենտացնել, և դժվար է այն կայուն պահել 37°C-ում երկար ժամանակ առանց պաշտպանիչ նյութի:
4. Հեշտ է նստել
Սպիտակուց K-ի սառեցված չորացրած փոշին պատրաստելիս, որպեսզի համոզվենք, որ չորացրած փոշու մեջ պրոտեինազ K-ի պինդ պարունակությունը մեծ է, անհրաժեշտ է ավելացնել սառեցված չորացրած պաշտպանիչ նյութ բարձր կոնցենտրացիայով, բայց երբ պրոտեինազ K-ի կոնցենտրացիան հասնում է 20մգ/մլ և ավելի, դա հեշտ է: Ագրեգացումը ձևավորում է նստվածք, որը մեծ դժվարություններ է առաջացնում բարձր պինդ պարունակությամբ պրոտեինազ K-ի սառեցմամբ չորացնելու համար:
5. Խոշոր ներդրում
Proteinase K-ն ունի ուժեղ պրոթեզերոնի ակտիվություն և կարող է լաբորատորիայում հիդրոլիզացնել այլ պրոտեազներ:Հետևաբար, պրոտեինազ K-ն պահանջում է մասնագիտացված արտադրական տարածքներ, սարքավորումներ և անձնակազմ՝ հետազոտության և զարգացման և արտադրության համար:
XD BIOCHEM-ի պրոտեինազ K լուծույթ
XD BIOCHEM has a mature protein expression and purification platform, and has rich experience in the expression and purification of recombinant proteins and optimization of production processes. Through the rapid formation of a research and development team, the large-scale production process of proteinase K has been overcome. The monthly output of freeze-dried powder is more than 30 KG. The product has stable performance, high enzyme specific activity, and no host cytochrome and nucleic acid residues. Welcome to contact XD BIOCHEM Obtain a trial package (E-mail: sales@xdbiochem.com Tel: +86 513 81163739).
XD BIOCHEM-ի տեխնիկական լուծումները ներառում են
Օգտագործելով բազմապատճենային պլազմիդային ինտեգրացիա՝ ընտրվում են բարձր արտահայտման շտամներ՝ 8գ/լ արտահայտման մակարդակով, ինչը հաղթահարում է պրոտեինազ K-ի ցածր արտահայտման մակարդակի խնդիրը;
Բազմաստիճան մաքրման գործընթացի հաստատման միջոցով պրոտեինազ K-ի հյուրընկալող ցիտոքրոմի և նուկլեինաթթվի մնացորդները հաջողությամբ հեռացվեցին ստանդարտ արժեքից ցածր;
Պաշտպանական բուֆերային ձևակերպումների բարձր թողունակության սքրինինգի միջոցով ընտրվել է բուֆեր, որը կարող է կայուն պահել պրոտեինազ K-ն 37°C ջերմաստիճանում;
Սքրինինգային բուֆերները հաղթահարում են այն խնդիրը, որ պրոտեինազ K-ն հեշտ է ագրեգացվում և նստում բարձր կոնցենտրացիաներում, և հիմք է դնում պրոտեինազ K-ի բարձր պինդ պարունակությամբ սառեցման-չորացման համար:

XD BIOCHEM պրոտեինազ K նմուշ

XD BIOCHEM պրոտեինազի K կայունության թեստ. 80 օր հետո սենյակային ջերմաստիճանում ակտիվության էական փոփոխություն չի լինի

XD BIOCHEM պրոտեինազի K կայունության թեստ. 80 օր հետո սենյակային ջերմաստիճանում ակտիվության էական փոփոխություն չի լինի

XD BIOCHEM պրոտեինազ K-ի և մրցակցող արտադրանքի նուկլեինաթթվի արդյունահանման ազդեցության համեմատությունը:Նուկլեինաթթվի արդյունահանման գործընթացում օգտագործվում են համապատասխանաբար XD BIOCHEM և մրցունակ պրոտեինազ K:XD BIOCHEM պրոտեինազ K-ի արդյունահանման արդյունավետությունն ավելի բարձր է, իսկ թիրախ գենի Ct արժեքը՝ ավելի ցածր: