ONPG CAS:369-07-3 98.0% Min White To Off-White Powder
Կատալոգի համարը | XD90006 |
CAS | 369-07-3 |
ապրանքային անուն | ONPG (2-Nitrophenyl-beta-D-galactopyranoside) |
Մոլեկուլային բանաձև | C12H15NO8 |
Մոլեկուլային քաշը | 301.25 |
Պահպանման մանրամասները | 2-ից 8 °C |
Ներդաշնակեցված սակագնային օրենսգիրք | 29400000 |
Ապրանքի ճշգրտում
Մաքրություն (HPLC) | Min.98.0% |
Արտաքին տեսք | Սպիտակից մինչև սպիտակ փոշի |
Լուծում(1% ջրում) | Թափանցիկ, անգույնից թեթևակի դեղնավուն լուծույթ |
Ջրի պարունակությունը(Կարլ Ֆիշեր) | Մաքս.0.5% |
Հատուկ օպտիկական պտույտ [α]D20(c=1, H2O) | - 65,0 ° C-ից -73,0 ° C |
Քննարկում ONPG թեստի վերաբերյալ (β-գալակտոզիդազի թեստ)
Վերջերս հաճախակի են բարձրացվում հարցեր. 1. Ինչու՞ կարող է օգտագործվել ONPG թեստը` տարբերելու կաթնաշաքարի հետաձգված խմորումը:2. Ինչու՞ է ազգային ստանդարտում նշվում, որ ONPG թեստի համար անհրաժեշտ է օգտագործել 3% նատրիումի քլորիդ տրիսաքարիդ երկաթ (կամ տրիսախարիդ երկաթ):3. Vibrio parahaemolyticus-ի համար, OPNG թեստ անցկացնելիս, ինչո՞ւ պետք է տոլուենը կաթիլ-կաթիլով ավելացվի ստանդարտի համաձայն:Ո՞րն է գործառույթը:
Մեր ընկերությունը վերանայել է բազմաթիվ տեղեկություններ, ամփոփել դրանք և կիսվել ձեզ հետ ստորև.
Սկզբունք. ONPG-ի չինական անվանումը o-nitrobenzene-β-D-galactopyranoside է:ONPG-ն կարող է հիդրոլիզացվել գալակտոզայի և դեղին օ-նիտրոֆենոլի (ONP) β-գալակտոզիդազի միջոցով, ուստի β-գալակտոզիդազի ակտիվությունը կարող է հայտնաբերվել կուլտուրայի միջավայրի գունային փոփոխությամբ:
Լակտոզան շաքար է, որը միկրոօրգանիզմների մեծ մասը պետք է հայտնաբերի:Դրա նյութափոխանակության համար անհրաժեշտ է երկու ֆերմենտ, մեկը բջջային պերմեազն է, կաթնաշաքարը ներթափանցում է բջիջներ պերմեազի ազդեցության տակ;մյուսը β-գալակտոզիդազն է, որը լակտոզը հիդրոլիզացնում է գալակտոզայի:Լակտոզա և գլյուկոզա.β-Գալակտոզիդազը կարող է նաև ուղղակիորեն ազդել ONPG-ի վրա՝ այն հիդրոլիզացնելու համար գալակտոզայի և դեղին օ-նիտրոֆենոլի (ONP):Այն կարելի է անել 24 ժամում, նույնիսկ կաթնաշաքարով ուշացած խմորիչներով:Հետևաբար, այն բացատրում է ագարի թեքությունից 1 կուլտուրա հավաքելու և 36°C-ում 1-3 ժամ և 24 ժամվա ընթացքում ամբողջական շրջանով պատվաստման արդյունքները:Եթե β-գալակտոզիդազ է արտադրվում, ապա այն 1-3 ժամում դեղնում է, եթե այդպիսի ֆերմենտ չկա, 24 ժամում այն չի փոխի գույնը։
Ըստ վերը նշված երկու ֆերմենտների՝ միկրոօրգանիզմները կարելի է բաժանել հետևյալ կատեգորիաների.
1 կաթնաշաքար խմորող (18-24 ժամ) բակտերիաներ պերմեազով և β-գալակտոսիդազով P + G +;
2 Հետաձգված կաթնաշաքարային ֆերմենտներ (տևում է ավելի քան 24 ժամ), որոնք չունեն պերմեազ, բայց ունեն գալակտոզիդազ՝ P-G+:
3 Ոչ կաթնաշաքարային ֆերմենտներ, որոնք զուրկ են և՛ պերմեազից, և՛ գալակտոզիդազից. P-G-:
ONPG թեստը կարող է օգտագործվել կաթնաշաքարի հետաձգման ֆերմենտացնող բակտերիաները (P-G+) չֆերմենտացող լակտոզային բակտերիաներից (PG-) տարբերելու համար, ինչպիսիք են.
1 Տարբերակել ուշ կաթնաշաքարային խմորիչները (P-G+) ոչ կաթնաշաքարային խմորիչներից (P-G-):
ա) Citrobacter (+) և Salmonella arizonae (+) Salmonella-ից (-):
բ) Escherichia coli (+) Shigella sonnei-ից (-):
Ինչո՞ւ է ONPG-ի վերլուծությունը կատարվել՝ օգտագործելով մեկ գիշերվա կուլտուրա 3% նատրիումի քլորիդ երկաթի տրիսաքարիդով (երկաթի տրիսաքարիդ):Մեր ընկերությունը խորհրդակցել է բազմաթիվ տեղեկությունների հետ, սակայն հստակ հայտարարություն չկա:Միայն FDA-ի կայքում գրված է, որ «Տեղադրել եռակի շաքարի երկաթի ագարի թեքության վրա փորձարկվող մշակույթները և ինկուբացնել 18 ժամ 37°C-ում (կամ այլ համապատասխան ջերմաստիճանում, եթե պահանջվում է): Սննդարար (կամ այլ) ագարի թեք պարունակող 1.0 % լակտոզա կարող է օգտագործվել նաև»։նշանակում է. փորձարկման բակտերիաները պատվաստվել են երկաթի տրիսախարիդային միջավայրի վրա և 18 ժամվա ընթացքում մշակվել 37°C ջերմաստիճանում:Ընդունելի են նաև 1% կաթնաշաքար պարունակող սննդարար ագարի թեք (կամ այլ) միջավայր:Հետևաբար, ենթադրվում է, որ երկաթի տրիսախարիդային միջավայրը պարունակում է լակտոզա:Գիշերվա աճից հետո բակտերիաները լավ ակտիվ β-գալակտոզիդազ են արտադրել:Օգտագործելով նման բակտերիաներ, ONPG-ն կարող է ավելի արագ քայքայվել β-գալակտոզիդազով:Փորձարարական երևույթն ավելի արագ և ավելի լավ է դրսևորվում։Բացի այդ, տոլուոլի կաթիլային ավելացումը և ջրային բաղնիքը 5 րոպեի ընթացքում բոլորն են՝ β-գալակտոզիդազը լիովին ազատելու համար: