p-Nitrophenyl-aL-Fucopyranoside Cas:10231-84-2 Սպիտակից գունատ դեղին բյուրեղային փոշի
| Կատալոգի համարը | XD90142 |
| ապրանքային անուն | p-Nitrophenyl-aL-Fucopyranoside |
| CAS | 10231-84-2 |
| Մոլեկուլային բանաձև | C12H15NO7 |
| Մոլեկուլային քաշը | 285.25 |
| Պահպանման մանրամասները | 2-ից 8 °C |
| Ներդաշնակեցված սակագնային օրենսգիրք | 29400000 |
Ապրանքի ճշգրտում
| Արտաքին տեսք | Սպիտակից գունատ դեղին բյուրեղային փոշի |
| Ասսաy | 99% |
| TLC | Մեկ տեղ |
| Մաքրության HPLC | Նվազագույնը 98% |
| Լուծելիություն (1% ջրում) | Թափանցիկ անգույն լուծույթ |
| Խտություն | 1,503±0,06 գ/սմ3 (20 ºC 760 Torr), |
| Հալման ջերմաստիճանը | 196-197 ºC |
| Եռման կետ | 515.4°Cat760mmHg |
| Բռնկման կետ | 265,5°C |
| Refractive ինդեքս | 1.623 |
LecA-ն (PA-IL) ցիտոտոքսիկ լեկտին և ադհեզին է, որն արտադրվում է Pseudomonas aeruginosa-ի կողմից, որը կապում է հիդրոֆոբ գալակտոզիդները բարձր յուրահատկությամբ և մերձեցմամբ:Օգտագործելով lecA-egfp թարգմանության միաձուլումը և կենսաթաղանթի արտաբջջային մատրիցայի իմունոբլոտային վերլուծությունը, մենք ցույց ենք տալիս, որ lecA-ն արտահայտվում է բիոֆիլմի աճեցված բջիջներում:Ե՛վ պոլիստիրոլի, և՛ չժանգոտվող պողպատի ստատիկ բիոֆիլմի փորձարկումներում բիոֆիլմի խորությունը և մակերևույթի ծածկույթը կրճատվել է lecA-ի մուտացիայով և ուժեղացվել է LecA գերարտադրող PAO-P47 շտամում:Կենսաթաղանթի մակերեսի ծածկույթը մայր շտամով, PAO-P47, բայց ոչ պողպատե կտրոնների վրա lecA մուտանտով, նույնպես արգելակվել է իզոպրոպիլ-բետա-D-թիոգալակտոզիդի (IPTG) կամ պ-նիտրոֆենիլ-ալֆա-D-գալակտոզիդի առկայության դեպքում ( NPG):Ավելին, այս հիդրոֆոբ գալակտոզիդների բացակայության դեպքում ձևավորված վայրի տիպի հասուն բիոֆիլմերը կարող են ցրվել IPTG-ի ավելացման միջոցով:Ի հակադրություն, p-nitrophenyl-alpha-L-fucose (NPF) ավելացումը, որն ունի բարձր մերձեցում P. aeruginosa LecB (PA-IIL) lecti n-ի նկատմամբ, որևէ ազդեցություն չի ունեցել բիոֆիլմի ձևավորման կամ ցրման վրա:P. aeruginosa PAO1-ի պլանկտոնային աճը չի ազդել IPTG-ի, NPG-ի կամ NPF-ի առկայության վրա, ինչպես նաև շտամը չի կարողացել օգտագործել այս շաքարները որպես ածխածնի աղբյուրներ, ինչը ենթադրում է, որ բիոֆիլմի ձևավորման վրա դիտարկվող ազդեցությունները պայմանավորված են LecA-լիգանդի մրցակցային արգելակմամբ: պարտավորեցնող.Նմանատիպ արդյունքներ են ստացվել նաև պողպատե կտրոնների վրա դինամիկ հոսքի պայմաններում աճեցված բիոֆիլմերի համար, ինչը ենթադրում է, որ LecA-ն նպաստում է P. aeruginosa բիոֆիլմի ճարտարապետությանը շրջակա միջավայրի տարբեր պայմաններում:
Արաբիդոպսիս բույսերի տերևներում հայտնաբերվել է ալֆա-L-ֆուկոզիդազ (EC 3.2.1.51), որը կարող է ազատել t-fucosyl մնացորդը xyloglucan oligosaccharides-ի կողային շղթայից:Ավելին, ալֆա-L-ֆուկոզիդազը, որն ունի նմանատիպ սուբստրատի յուրահատկություն, մաքրվել է կաղամբի (Brassica oleracea) տերևներից՝ SDS-PAGE-ի վրա մեկ ժապավեն ստանալու համար:Այս սպիտակուցային խմբից ստացվել են երկու պեպտիդային հաջորդականություններ, որոնք օգտագործվել են ալֆա-ֆուկոզիդազի համար կոդավորող արաբիդոպսիս գենը նույնականացնելու համար, որը մենք առաջարկում ենք անվանել AtFXG1:Բացի այդ, հայտնաբերվել է նաև արաբիդոպսիս գեն՝ հայտնի ալֆա-L-ֆուկոզիդազների հետ հոմոլոգիայով, և մենք առաջարկել ենք այն անվանել AtFUC1:Ե՛վ AtFXG1, և՛ ATFUC1-ը հետերոլոգիկ կերպով արտահայտված էին Pichia pastoris բջիջներում և ալֆա-L-ֆուկոզիդազի ակտիվությունն արտազատվում էր կուլտուրայի միջավայրում:AtFXG1-ով կոդավորված ալֆա-L-ֆուկոզիդազը ակտիվ էր քսիլոգլուկան XXFG-ի օլիգոսաքարիդների, ինչպես նաև 2'-ֆուկոզիլ-լակտիտոլի, բայց ոչ p-nitrophenyl-alpha-L-fucopyranoside-ի դեմ:Այնուամենայնիվ, AtFUC1-ը հետերոլոգորեն արտահայտված ակտիվ էր միայն 2'-ֆուկոզիլ-լակտիտոլի դեմ:Այսպիսով, առաջինը պետք է կապված լինի xyloglucan նյութափոխանակության հետ:
