PUROMYCIN DIHYDROCHLORIDE Cas: 58-58-2 98% Սպիտակ փոշի
Կատալոգի համարը | XD90195 |
ապրանքային անուն | Պուրոմիցին դիհիդրոքլորիդ |
CAS | 58-58-2 |
Մոլեկուլային բանաձև | C22H31Cl2N7O5 |
Մոլեկուլային քաշը | 544.431 |
Պահպանման մանրամասները | -15-ից -20 °C |
Ներդաշնակեցված սակագնային օրենսգիրք | 29419000 |
Ուղեծրային ֆիբրոբլաստների տարբերակումը հասուն ադիպոցիտների և ճարպային հյուսվածքի հետագա կուտակումը ցուցադրվել է Գրեյվսի օրբիտոպաթիայի (GO) առաջընթացի ժամանակ:Աուտոֆագիան ներգրավված է ադիպոգենեզում, սակայն քիչ բան է հայտնի GO-ի սկզբնավորման և առաջընթացի մեջ աուտոֆագիայի դերի մասին:Այս հետազոտության նպատակն է ուսումնասիրել աուտոֆագիայի դերը GO-ի պաթոգենեզում: Վերլուծվել են GO-ով հիվանդների և նորմալ առարկաների ուղեծրի ճարպային/շարակցական հյուսվածքի արտանետումները, ինչպես նաև ուղեծրի մեկուսացված ֆիբրոբլաստները:Ադիպոգենեզը հրահրվել է տարբերակիչ միջավայրի միջոցով՝ ջրածնի պերօքսիդով կամ առանց դրա, իսկ աուտոֆագիան մանիպուլյացիայի է ենթարկվել՝ օգտագործելով bafilomycin A1 և Atg5 ուղղված կարճ մազակալի ՌՆԹ (shRNA):Ավտոֆագոսոմները հայտնաբերվել են էլեկտրոնային մանրադիտակով:Աուտոֆագիայի հետ կապված գեների և ադիպոգենեզի հետ կապված տրանսկրիպցիոն գործոնների արտահայտումը վերլուծվել է իրական ժամանակում հակադարձ տրանսկրիպցիոն-պոլիմերազային շղթայական ռեակցիայի և/կամ Western blot վերլուծության միջոցով:Լիպիդային կաթիլների կուտակումն ուսումնասիրվել է Oil Red O-ի ներկման միջոցով: Ավտոֆագիկ վակուոլներն ավելի շատ են եղել GO բջիջներում, քան ոչ GO բջիջներում (p<0.05):Աուտոֆագիայի հետ կապված գեների արտահայտումը GO հյուսվածքներում և բջիջներում էականորեն ավելի բարձր է եղել, քան համապատասխանաբար նրանց ոչ GO գործընկերների մոտ:Ինտերլեյկին-1β-ն ավելացրել է LC3-II, p62 և Atg7 սպիտակուցը GO բջիջներում:Ավտոֆագոսոմի կուտակումը ցուցադրվել է ադիպոգենեզի 4-րդ օրը և նվազել 10-րդ օրը՝ լիպիդային կաթիլների ձևավորման հետ մեկտեղ:LC3 և p62 սպիտակուցների էքսպրեսիան ավելացել է տարբերակումից հետո 48 ժամվա ընթացքում և աստիճանաբար նվազել է 4-րդ օրվանից մինչև 10-րդ օրը: Bafilomycin A1 բուժումը և Atg5 նոկդաունը shRNA-ի միջոցով արգելակել են լիպիդային կաթիլների կուտակումը և ճնշել ադիպոգեն մարկերների արտահայտումը: Ինքնաֆագիան ավելացել է GO հյուսվածքներում և բջիջներում ոչ GO հյուսվածք և բջիջներ, ինչը ենթադրում է, որ աուտոֆագիան դեր է խաղում GO-ի պաթոգենեզում:Աուտոֆագիայի մանիպուլյացիան կարող է լինել GO-ի թերապևտիկ թիրախ:
4-Նիտրոֆենիլ-N-ացետիլ-β-D-գլյուկոզամինիդը օգտակար ենթաշերտ է մարդու մեզի մեջ N-ացետիլ-b-գլյուկոզամինիդազի ակտիվության արագ գունամետրիկ հետազոտության համար:Քրոմոգեն β-գլյուկոզամինիդազային սուբստրատ, որը դեղին լուծույթ է տալիս ճեղքման ժամանակ, որն օգտագործվում է հատկապես խմորիչներում և կաղապարներում: