X-GAL CAS:7240-90-6 98% Սպիտակից մինչև բաց սպիտակ բյուրեղային փոշի
| Կատալոգի համարը | XD90008 |
| ապրանքային անուն | X-Gal (5-Bromo-4-chloro-3-indolyl-beta-D-galactopyranoside) |
| CAS | 7240-90-6 |
| Մոլեկուլային բանաձև | C14H15BrClNO6 |
| Մոլեկուլային քաշը | 408,63 |
| Պահպանման մանրամասները | -2-ից -6 °C |
| Ներդաշնակեցված սակագնային օրենսգիրք | 29400000 |
Ապրանքի ճշգրտում
| Լուծման տեսքը | Թափանցիկ, անգույնից բաց դեղին լուծույթ (50 մգ/մլ DMF:MeOH, 1:1) |
| Հատուկ օպտիկական ռոտացիա | -61,5 +/- 1 |
| Արտաքին տեսք | Սպիտակից մինչև սպիտակ բյուրեղային փոշի |
| Մաքրության HPLC | min 99% |
| Լուծելիություն (5% DMF-ում) | Լուծվող (5% w/v, DMF) |
| Ջուր KF | առավելագույնը 1% |
| Փորձարկում (HPLC անջուր հիմքի վրա) | min 98% w/w |
X-gal-ի օգտագործումը
X-gal-ը (նաև կրճատ՝ BCIG՝ 5-բրոմ-4-քլորո-3-ինդոլիլ-β-D-գալակտոպիրանոզիդ) օրգանական միացություն է, որը բաղկացած է գալակտոզից՝ կապված փոխարինված ինդոլի հետ։Միացությունը սինթեզվել է Ջերոմ Հորվիցի և նրա գործընկերների կողմից 1964 թվականին: Քիմիական պաշտոնական անվանումը հաճախ կրճատվում է ավելի քիչ ճշգրիտ, բայց նաև ավելի քիչ դժվար արտահայտություններով, ինչպիսիք են բրոմոքլորինդոքսիլ գալակտոզիդը:Ինդոքսիլից X-ը կարող է լինել X-ի աղբյուրը X-gal կծկումում:X-gal-ը հաճախ օգտագործվում է մոլեկուլային կենսաբանության մեջ՝ ստուգելու համար ֆերմենտի՝ β-գալակտոզիդազի առկայությունը իր սովորական թիրախի՝ β-գալակտոզիդի տեղում:Այն նաև օգտագործվում է այս ֆերմենտի ակտիվությունը հայտնաբերելու համար հիստոքիմիայի և մանրէաբանության մեջ:X-gal-ը բազմաթիվ ինդոքսիլ գլիկոզիդներից և էսթերներից մեկն է, որոնք ֆերմենտներով կատալիզացված հիդրոլիզի արդյունքում տալիս են անլուծելի կապույտ միացություններ, որոնք նման են ինդիգո ներկին:
X-gal-ը կաթնաշաքարի անալոգն է և, հետևաբար, կարող է հիդրոլիզացվել β-գալակտոզիդազ ֆերմենտի կողմից, որը կտրում է β-գլիկոզիդային կապը D-լակտոզայում:X-gal-ը, երբ ճեղքվում է β-գալակտոզիդազով, տալիս է գալակտոզա և 5-բրոմ-4-քլորո-3-հիդրօքսինդոլ - 1: Վերջինս այնուհետև ինքնաբերաբար կիսվում է և օքսիդանում 5,5'-դիբրոմ-4,4'-դիքլորի: -ինդիգո - 2, ինտենսիվ կապույտ արտադրանք, որը անլուծելի է:X-gal-ն ինքնին անգույն է, ուստի կապույտ գույնի արտադրանքի առկայությունը կարող է օգտագործվել որպես ակտիվ β-գալակտոզիդազի առկայության թեստ:Սա նաև թույլ է տալիս բակտերիալ β-գալակտոզիդազին (այսպես կոչված lacZ) օգտագործել որպես զեկուցող տարբեր ծրագրերում:
Երկու հիբրիդային վերլուծության ժամանակ β-գալակտոզիդազը կարող է օգտագործվել որպես ռեպորտաժ՝ միմյանց հետ փոխազդող սպիտակուցները հայտնաբերելու համար:Այս մեթոդով գենոմի գրադարանները կարող են ստուգվել սպիտակուցների փոխազդեցության համար՝ օգտագործելով խմորիչ կամ բակտերիալ համակարգ:Այնտեղ, որտեղ առկա է հաջող փոխազդեցություն ցուցադրվող սպիտակուցների միջև, դա կհանգեցնի ակտիվացման տիրույթի կապակցմանը պրոմոտորին:Եթե պրոմոտորը կապված է lacZ գենի հետ, ապա β-գալակտոզիդազի արտադրությունը, որը հանգեցնում է կապույտ պիգմենտային գաղութների ձևավորմանը X-gal-ի առկայության դեպքում, հետևաբար ցույց կտա սպիտակուցների միջև հաջող փոխազդեցությունը:Այս տեխնիկան կարող է սահմանափակվել 106-ից պակաս չափի գրադարանների ցուցադրմամբ: X-gal-ի հաջող բաժանումը նաև նկատելի տհաճ հոտ է ստեղծում՝ ինդոլի ցնդման պատճառով:
Քանի որ X-gal-ն ինքնին անգույն է, կապույտ գույնի արտադրանքի առկայությունը կարող է օգտագործվել որպես ակտիվ β-գալակտոզիդազի առկայության թեստ:
Ակտիվ ֆերմենտի այս հեշտ նույնականացումը թույլ է տալիս βգալակտոզիդազի գենին (lacZ գեն) օգտագործել որպես ռեպորտաժային գեն տարբեր ծրագրերում:
