Ապրանքներ

Սիգմա ընկալիչ 1-ը (σR1) ոչ ափիոնային տրանսմեմբրանային սպիտակուց է, որը կարող է հանդես գալ որպես մոլեկուլային կապերոն էնդոպլազմիկ ցանց-միտոքոնդրիալ թաղանթում:σR1-ի լիգանդները, ինչպիսիք են (+)-pentazocine [(+)-PTZ]-ը, ապահովում են ցանցաթաղանթի ընդգծված նյարդապաշտպանություն in vivo և in vitro:Վերջերս մենք վերլուծեցինք մկների ցանցաթաղանթի ֆենոտիպը, չունենալով σR1 (σR1 KO) և դիտեցինք ցանցաթաղանթի նորմալ մորֆոլոգիա և գործառույթ երիտասարդ մկների մոտ (5-30 շաբաթ), բայց նվազեցրեց բացասական սկոտոպային շեմային պատասխանները (nSTRs), ցանցաթաղանթի գանգլիոն բջիջների (RGC) կորուստը և խանգարումը: օպտիկական նյարդի աքսոնները, որոնք համապատասխանում են ցանցաթաղանթի ներքին դիսֆունկցիայի 1 տարվա ընթացքում:Այս տվյալները մեզ ստիպեցին փորձարկել այն վարկածը, որ σR1-ը կարող է կարևոր լինել ցանցաթաղանթի խրոնիկական սթրեսը կանխելու համար.շաքարախտը օգտագործվել է որպես քրոնիկական սթրեսի մոդել: Որոշելու համար, թե արդյոք σR1-ն անհրաժեշտ է (+)-PTZ նեյրոպաշտպանիչ էֆեկտների համար, վայրի տիպի (WT) և σR1 KO մկներից մեկուսացված առաջնային RGC-ները ենթարկվել են քսանտին-քսանտին օքսիդազի (10 μM: 2 mU/ml) օքսիդատիվ սթրես առաջացնելու համար (+)-PTZ-ի առկայության կամ բացակայության դեպքում:Բջջային մահը գնահատվել է տերմինալ դեզօքսինուկլեոտիդիլ տրանսֆերազա dUTP մականունի վերջի պիտակավորման (TUNEL) վերլուծությամբ:RGC ֆունկցիայի վրա քրոնիկական սթրեսի ազդեցությունը գնահատելու համար շաքարախտը դրդվել է 3-շաբաթյա C57BL/6 (WT) և σR1 KO մկների մոտ՝ օգտագործելով streptozotocin՝ ստանալու չորս խումբ՝ WT ոչ դիաբետիկ (WT ոչ-DB), WT դիաբետիկ (WT-DB): ), σR1 KO ոչ DB, և σR1 KO-DB:12 շաբաթական շաքարախտից հետո, երբ մկները 15 շաբաթական էին, գրանցվեց ներակնային ճնշումը (IOP), անցկացվեց էլեկտրաֆիզիոլոգիական թեստ (ներառյալ nSTR-ների հայտնաբերումը), և RGC-ների թիվը հաշվվեց ցանցաթաղանթի հյուսվածքաբանական բաժիններում: In vitro հետազոտությունները ցույց տվեցին, որ (+)-PTZ-ը չկարողացավ կանխել σR1 KO մկներից հավաքված RGC-ների օքսիդատիվ սթրեսից առաջացած մահը, սակայն ապահովեց ամուր պաշտպանություն WT մկներից հավաքված RGC-ների մահից:Շաքարային դիաբետով առաջացած քրոնիկական սթրեսի ուսումնասիրությունների ժամանակ մկների չորս խմբերում չափված IOP-ը նորմալ միջակայքում էր.այնուամենայնիվ, նկատվել է σR1 KO-DB մկների IOP-ի զգալի աճ (16 ± 0,5 մմ Hg)՝ համեմատած փորձարկված մյուս խմբերի հետ (σR1 KO ոչ-DB, WT ոչ-DB, WT-DB՝ ~12 ± 0,6 մմ Hg: )Ինչ վերաբերում է էլեկտրաֆիզիոլոգիական փորձարկմանը, σR1 KO ոչ DB մկների nSTR-ները նման էին WT ոչ DB մկների 15 շաբաթվա ընթացքում;Այնուամենայնիվ, դրանք զգալիորեն ցածր էին σR1 KO-DB մկների մոտ (5 ± 1 µV) մյուս խմբերի համեմատ, ներառյալ, հատկապես, σR1 KO-nonDB (12±2 µV):Ինչպես և սպասվում էր, σR1 KO ոչ-DB մկների մեջ RGC-ների թիվը նման էր WT ոչ-DB մկների 15 շաբաթվա ընթացքում, բայց շաքարախտի քրոնիկ սթրեսի պայմաններում σR1 KO-DB մկների ցանցաթաղանթում ավելի քիչ RGC-ներ կային: Սա առաջին զեկույցն է: ցույց տալով միանշանակ, որ (+)-PTZ-ի նեյրոպաշտպանիչ ազդեցությունները պահանջում են σR1:σR1 KO մկները երիտասարդ տարիքում ցույց են տալիս ցանցաթաղանթի նորմալ կառուցվածք և գործառույթ;Այնուամենայնիվ, երբ ենթարկվում են շաքարախտի քրոնիկ սթրեսին, σR1 KO մկների մոտ նկատվում է ցանցաթաղանթի ֆունկցիոնալ դեֆիցիտի արագացում, այնպես որ գանգլիոնային բջիջների դիսֆունկցիան նկատվում է շատ ավելի վաղ տարիքում, քան ոչ դիաբետիկ σR1 KO մկները:Տվյալները հաստատում են այն վարկածը, որ σR1-ը առանցքային դեր է խաղում ցանցաթաղանթի լարվածության մոդուլավորման մեջ և կարող է լինել ցանցաթաղանթի հիվանդության կարևոր թիրախ: